Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ?

Метод лабораторной диагностики - иммуноферментный анализ (ИФА) - основывается на реакции связывания между антигеном и антителом. Он позволяет выявлять различные белковые вещества как вирусной, так и бактериальной природы, а также ферменты и другие компоненты биологических жидкостей. Сегодня ИФА является неотъемлемой частью современной диагностики, которая не может обойтись без высокочувствительных лабораторных анализов. Ранее, для выявления причин различных симптомов, врачам приходилось ориентироваться на косвенные признаки болезни и проводить микроскопические исследования в поисках возбудителя инфекции. Однако в настоящее время диагноз может быть подтвержден или опровергнут благодаря лишь одному тесту - иммуноферментному анализу.

Суть иммуноферментного анализа состоит в реакции "антиген - антитело".

Антиген – это молекула, чужда организму, которая обычно является белком и может попасть в организм человека вместе с инфекционным агентом. Кроме того, чужеродные кровеносные частицы, несовместимые с группой крови человека, также могут быть антигенами.

Антигены могут вызывать иммунную реакцию в организме, направленную на защиту внутренней среды от посторонних веществ. В ответ человеческий организм синтезирует специальные вещества – антитела (иммуноглобулины), которые способны соединяться с антигенами по принципу "ключ в замок", образуя иммунные комплексы. Такие комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета. Именно на этой реакции основан принцип иммуноферментного анализа.

Обзор основных показателей

Один из способов определить наличие инфекционного процесса в организме - это анализ на наличие класса иммуноглобулинов. Существует несколько видов иммуноглобулинов, которые можно использовать для анализа заболевания: IgM, IgA и IgG.

Присутствие IgM свидетельствует о наличии острого инфекционного процесса в организме. Если IgM не выявлено, это может указывать на то, что в организме отсутствует конкретный возбудитель, либо же инфекция перешла в хроническую стадию.

Если результат теста на IgM отрицательный, а уровень IgA повышен, это обычно свидетельствует о реинфекции, хроническом или скрыто протекающем заболевании.

Если же обнаружены оба класса иммуноглобулинов - IgM и IgA, это может указывать на разгар острого периода заболевания.

Наличие IgG может говорить о хронизации заболевания, либо о том, что организм выработал иммунитет к инфекционному агенту и начал выздоравливать.

Выводы о состоянии здоровья человека следует делать на основе результатов всего комплекса анализов и сведений о состоянии здоровья в целом.

Возможные результаты ИФА

Отчетливые данные, отображаемые в виде таблицы, являются частой формой представления результатов анализа ИФА. Эти данные могут включать в себя перечисление всех антител или антигенов, с указанием результатов теста, отрицательных или положительных. Они также могут содержать количественный показатель, который указывает на количество антител в образце. Такой показатель может быть отрицательным, слабоположительным, положительным или резко положительным.

Еще один количественный показатель - индекс авидности антител, выраженный в процентах. Если индекс выше, это указывает на то, что инфекционный процесс длится дольше.

ИФА – это один из тех анализов, которые помогают, при самых разных патологиях, обнаружить специфические антитела и антигены. Существует тысячи различных видов тест-систем ИФА, поэтому этот метод используется в большинстве медицинских отделений. Результаты ИФА позволяют определить правильный диагноз и назначить оптимальную терапию, что обеспечивает эффективное лечение заболевания.

Различные типы антител: как они действуют и как их использовать

Антитела – это часть иммунной системы, которая борется с инфекциями. Существует несколько типов антител, каждое из которых предназначено для определенного этапа в борьбе с инфекцией.

Первыми антителами, которые вырабатываются в ответ на антиген (чужеродный белок), являются иммуноглобулины класса M (IgM). Обычно уровень IgM наиболее высок в течение первых дней инфекционного процесса.

Затем иммунная система производит иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены и укрепляют иммунитет организма против повторного инфицирования. Этому явлению приписывают большое значение при вакцинации, так как благодаря прививке в крови появляется достаточное количество IgG, которые могут быстро подавить инфекцию и предотвратить нанесение вреда здоровью.

Кроме того, существуют и антитела класса A (IgA), которые обнаруживаются в большом количестве в слизистых оболочках организма и задают «внутреннюю линию обороны», предотвращая заражение. Антитела класса E (IgE) используются в борьбе с паразитарными инфекциями.

В лабораторной диагностике обычно используются IgM, IgG и IgA. Их концентрация позволяет определить стадию инфекционного процесса, а также выявить, страдал ли человек определенным заболеванием, таким как краснуха или ветряная оспа.

Иммуноферментный анализ, или ИФА, назначается врачами, если они подозревают определенную инфекцию или если нужно измерить концентрацию определенного гормона. Он помогает определить, какие антигены или антитела присутствуют в организме человека.

Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или антитела, если нужно найти антиген). Образец биологической жидкости (обычно это сыворотка крови) вводится в лунки. Затем происходит или не происходит образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать вывод о результате анализа.

ИФА может быть качественным и количественным. В первом случае ответ будет однозначным: либо искомое вещество найдено, либо нет. В случае количественного анализа цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека. Это поможет понять, как развивается инфекционный процесс.

Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором для идентификации успешной реакции использовались меченые антитела и антигены. Однако, проведение такой диагностики представляло потенциальную угрозу для здоровья сотрудников лаборатории. В 1971 году учеными был изобретен ИФА, который оказался безопасным альтернативным способом идентификации реакции.

Какие плюсы имеет иммуноферментный анализ?

Иммуноферментный анализ (ИФА) применяется в лабораторной диагностике и имеет несколько преимуществ, которые делают его более точным и эффективным для выявления заболеваний. Вот некоторые из них:

• Высокая чувствительность. ИФА позволяет обнаружить искомое вещество, даже если его концентрация в образце очень низкая.
• Высокая специфичность. Диагностика с помощью ИФА безошибочная - если результат положительный, значит, найдены именно те антитела или антигены, которые предполагались, а не другие.
• Раннее выявление заболевания. ИФА заменил бактериологический метод диагностики, который был достаточно затратным и сложным. Определение IgM с помощью ИФА позволяет точно диагностировать заболевание уже в первые дни его проявления.
• Минимальный процент ошибок. Использование иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Результат анализа считается точным, так как большинство тестовых систем и реактивов для ИФА производятся в промышленных условиях.

Минусы данного метода

В ходе проведения иммуноферментного анализа (ИФА) необходимо знание, что конкретно искать, так как методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому, для преднамеренного «угадывания» диагноза, нет необходимости назначать такой тест.

Для выявления возбудителя и определения его специфичных свойств при диагностики инфекционных заболеваний, ИФА неспособен. Этот метод лишь показывает наличие антител в крови пациента, непосредственно указывающих на наличие инородного микроорганизма в организме.

Несомненно, ИФА является высокоточным методом, однако он не является самым дешевым, поэтому для правильного его применения, необходимо подходить умным образом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Показания для проведения иммуноферментного анализа (ИФА) невозможно перечислить полностью, однако наиболее часто встречающиеся цели анализа следующие:

• Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
  • Поиск IgM и IgG антител к вирусным гепатитам A, B, C, D и E;
  • Определение IgG антител к ВИЧ;
  • Обнаружение IgM и IgG антител к цитомегаловирусу;
  • Выявление IgM и IgG антител к вирусу Эпштейна — Барр;
  • Поиск IgM и IgG антител к герпетическим инфекциям;
  • Обнаружение IgM и IgG антител к токсоплазмозу;
  • Определение IgM и IgG антител к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
  • Поиск IgG антител к паразитарным заболеваниям;
  • Обнаружение IgM и IgG антител к инфекциям, передающимся половым путем;
  • Определение IgG антител к хеликобактерной инфекции.
• Оценка наличия маркеров некоторых аутоиммунных заболеваний.
• Выявление онкологических маркеров, таких как простатспецифический антиген, раково-эмбриональный антиген и другие.
• Определение содержания гормонов в сыворотке крови, например, прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других.

Анализ биоматериала и сбор образца

Сыворотка крови является основным биоматериалом для проведения ИФА. В лаборатории берут образец крови из вены у пациента и удалют форменные элементы, что может затруднить проведение анализа. Для некоторых других случаев может использоваться спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Чтобы избежать искажений результатов анализа, рекомендуется сдавать кровь на пустой желудок и отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов за две недели до исследования, если целью является диагностика хронических инфекционных заболеваний, которые протекают скрыто.

Смотрящий срок готовности результатов ИФА

Если на складе имеются нужные реактивы и сбалансированная организация работы лаборатории, время ожидания результатов анализа может составить один или два рабочих дня после взятия крови. В случае, когда требуется получение экстренного ответа, этот период может быть сокращен до двух-трех часов.

Переписывая статью о расшифровке иммуноферментного анализа, стоит сохранять ее структуру без значительных изменений.

Иммуноферментный анализ (ИФА) - это диагностический метод, который используется для определения наличия или отсутствия определенного вещества в образце. В случае качественного ИФА результат будет однозначным: искомое вещество найдено или не найдено. Однако, если проводится количественный анализ, то концентрация может измеряться числовыми значениями или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Фото: freepik.com